ibidi μ-Slide 15 Well 3D載玻片不是僅僅可限于血管生成和管形成的分析的應用，還可以用于更多實(shí)驗的應用。

　　μ-Slide 15 Well 3D 的應用原理：

　　μ-Slide 15 Well 3D 具有專(zhuān)門(mén)的設計規格形狀，可輕松、方便且可重復地進(jìn)行管形成分析。它也是發(fā)芽測定、免疫熒光染色和一般 3D 細胞培養的理想選擇。3D載玻片具有 15 個(gè)孔，專(zhuān)為低通量測定而設計。對于大規模應用，ibidi 提供 μ-Plate 96 Well 3D。

　　在將凝膠加入內孔并給予時(shí)間凝固后，可以將細胞接種在其頂部以進(jìn)行管形成分析。由于采用了“孔中孔"技術(shù)，所需的凝膠量減少到每孔僅 10 μl，是常規多孔板用量的 10%。

　　此外，沒(méi)有形成凝膠彎液面。這確保了所有細胞都在一個(gè)光學(xué)平面上的均勻厚凝膠基質(zhì)的形成，創(chuàng )造了可重復的細胞培養條件。μ-Slide 15 Well 3D 可與所有常見(jiàn)的水凝膠基質(zhì)一起使用，例如 Matrigel®、膠原凝膠、瓊脂糖凝膠和透明質(zhì)酸凝膠。

圖片中μ-Slide 15 Well 3D采用了“孔中孔"嵌套式技術(shù)，每孔僅 10 μl凝膠，沒(méi)有形成凝膠彎液面

　　μ-Slide 15 Well 3D載玻片的應用廣泛：

　　1、管形成試驗或血管生成試驗：

　　對于管形成測定 （也稱(chēng)為血管生成測定），將內皮細胞接種在 10 μl 凝膠層（基底膜樣表面）的頂部，在那里它們形成毛細管樣結構。通常使用Matrigel® 。細胞的管形成能力可用于分析各種藥物的促血管生成或抗血管生成潛力。

　　2、3D 細胞培養：

　　在許多情況下，3D 環(huán)境比 2D 細胞培養更接近于體內情況。μ-Slide 15 Well 3D 是一種簡(jiǎn)單且經(jīng)濟高效的解決方案，用于培養和顯微鏡檢查嵌入凝膠基質(zhì)中的細胞。凝膠層直接連接到上面的介質(zhì)儲存器，可以通過(guò)擴散快速輕松地進(jìn)行介質(zhì)交換。

　　除了只有一種細胞類(lèi)型的培養物外，還可以在共培養實(shí)驗中研究不同細胞類(lèi)型（例如癌細胞和成纖維細胞）的侵襲行為。

　　或者，可以使用相同或不同的 3D 凝膠基質(zhì)（例如基質(zhì)膠或膠原蛋白）創(chuàng )建夾心培養物。

　　此外，可以固定非粘附細胞，如血細胞或細菌，以增強顯微鏡檢查。

　　3、免疫熒光染色：

　　為了分析管形成或 3D 培養實(shí)驗的結果，可以在 μ-Slide 15 Well 3D 中進(jìn)行免疫熒光染色。細胞可以直接在凝膠上或凝膠中固定和染色，然后使用高分辨率顯微鏡成像。

　　在 ibidi μ-Slide 15 Well 3D 中培養的成纖維細胞的遷移測定。左側的細胞分裂并聚合肌動(dòng)蛋白（綠色）以形成指示遷移方向的前沿。EdU 表示增殖細胞（紅色）。細胞核被 DAPI（藍色）染色。該圖像是使用配備 Airyscan 檢測器的 Zeiss LSM 880 共聚焦顯微鏡獲取的。圖片由意大利的里雅斯特國際基因工程和生物技術(shù)中心 (ICGEB) 心血管生物學(xué)組的 Ambra Cappelletto 和 Andrea Colliva 提供。

　　小鼠胚胎背根神經(jīng)節，在 ibidi µ-Slide 15 Well 3D 中培養，針對 β III 微管蛋白染色。使用配備 IN Cell Investigator 軟件（GE Healthcare，英國）的 IN Cell Analyzer 2000 在 i3S BioSciences Screening Unit 獲得的圖像。圖片由 Estrella Do Céu Neto 提供，i3S - Instituto de Investiga??o e Inova??o em Saúde / INEB-Instituto de Engenharia Biomédica，波爾圖大學(xué)，波爾圖，葡萄牙。

　　4、Focusing Cells聚焦細胞

　　當使用少于10μl的凝膠填充μ-Slide 15 well 3D的內孔時(shí)，可以培養少量細胞并將其聚焦在柔軟的凝膠表面上。

　　5、Low Volume Microscopy Chamber低容量腔室顯微鏡檢

　　μ-Slide 15 Well 3D也可以用作不含任何凝膠的腔室顯微鏡檢，這對于需要幾個(gè)微體積孔的實(shí)驗非常實(shí)用。