前言

      無(wú)論原發(fā)性腫瘤還是繼發(fā)性腫瘤，一旦生長(cháng)直徑超過(guò)1~2 mm，都會(huì )有血管生成。這是由于腫瘤細胞自身可分泌多種生長(cháng)因子，誘導血管生成。多數惡性腫瘤的血管生成密集且生長(cháng)迅速。因此，血管生成在腫瘤的發(fā)展轉移過(guò)程中起到重要作用，抑制這一過(guò)程將能明顯阻止腫瘤組織的發(fā)展和擴散轉移。于是體外的血管生成實(shí)驗就能很好的模擬腫瘤的血管發(fā)生過(guò)程，并且適合研究藥物對這一過(guò)程的影響實(shí)驗。本實(shí)驗以HUVEC細胞為例，介紹這一實(shí)驗的詳細過(guò)程。

    圖1   培養皿底部帶計數格坐標

圖2   培養皿底部計數格的示意圖

步驟：找到感興趣的細胞后，記下細胞的坐標信息（橫坐標是字母，縱坐標是數字），下次再觀(guān)察時(shí)，根據坐標信息找到細胞的位置，即可繼續觀(guān)察同一個(gè)細胞。

拓展應用：

1.底部的計數格可直接用于細胞計數，計數細胞無(wú)需轉移到計數板了；

圖3  邊長(cháng)500微米的計數格

圖4  邊長(cháng)50微米的計數格

2.鎖定感興趣的細胞，直接在培養皿里做免疫熒光實(shí)驗

圖5   小鼠免疫熒光染色效果（使用ibidi 35毫米培養皿的實(shí)驗效果）

如何選擇不同規格的計數格培養皿／載玻片？
根據實(shí)驗目的來(lái)！

＊指倒置熒光顯微鏡，共聚焦顯微鏡等顯微鏡
＊＊使用玻璃底的產(chǎn)品還可以有配套的蓋子進(jìn)行DIC活細胞成像