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破碎大量樣品、低溫破碎大量樣品、破碎堅硬或韌性較強的樣品時(shí),人工手動(dòng)研磨就成了實(shí)驗猿的噩夢(mèng)。當然,也有很多實(shí)驗猿已經(jīng)嘗試過(guò)市面一些研磨機/超聲波粉碎機,發(fā)現自己那頑固的樣品依然無(wú)法被破碎/破碎過(guò)程損壞了目標成分而十分心塞。
分享個(gè)高通量破碎動(dòng)植物組織和微生物的方法,別逗,當然不是靠徒手研磨能做到的,必須入手個(gè)神器——上海凈信的tissuelyser系列和JXFSTPRP系列多樣品組織研磨機。對于動(dòng)植物組織和微生物,包括一些難以破碎的組織樣品,都可以使用這個(gè)研磨機對其進(jìn)行粉碎。
特別地,一些尤其堅硬/韌性比較強的樣品,或要求維持低溫條件進(jìn)行破碎提取的樣品,需要結合液氮進(jìn)行研磨,如:皮膚、硬骨骼、軟骨、血管、結締組織、種子等;使用普通機械研磨方法,很難既保證研磨破碎效果又保證樣品一直處于低溫狀態(tài),尤其是提取RNA、酶等對溫度敏感的物質(zhì)時(shí),低溫狀態(tài)的控制顯得尤為關(guān)鍵。入手一臺上海凈信的多樣品組織研磨機,這些都不再是問(wèn)題了??凑校?/span>
注:由于樣品的具體差異及實(shí)驗要求的不同,下文數據部分請咨詢(xún)廠(chǎng)家。
*部分 破碎動(dòng)物組織
1)樣品:豬肌肉組織
2)儀器: Tissuelyser多樣品組織研磨機(品牌:上海凈信);
耗材:***毫升離心管和直徑***毫米的研磨鋼珠
3)步驟:
a.取***克左右肌肉組織樣品,均勻地剪切成少量樣品塊,分別放入若干***毫升的研磨離心管中。
b.每個(gè)試管中放入***顆直徑***毫米的研磨鋼珠和800μL PBS裂解液,分別蓋緊管蓋后,置入24孔研磨適配器中,再將適配器固定在研磨機中。
c.將Tissuelyser多樣品組織研磨機的參數設置為***赫茲,研磨***秒,啟動(dòng)研磨器。
d.研磨停止后,拿出研磨離心管,旋開(kāi)管蓋,取出研磨好的肌肉組織樣品。
4)結果:
研磨后的效果如圖1,豬肌肉組織成很細膩的泥漿狀,說(shuō)明Tissuelyser多樣品組織研磨機對豬肉組織的研磨效果良好。
圖1 豬肌肉研磨對比
第二部分 破碎植物組織
1)樣品:水稻葉片
2)儀器: Tissuelyser多樣品組織研磨機(品牌:上海凈信);
耗材:***毫升離心管和直徑***毫米的研磨鋼珠
3)步驟:
a.取***克左右葉片組織樣品,均勻地剪切成少量樣品塊,分別放入若干***毫升的研磨離心管中。
b.每個(gè)試管中放入***顆直徑***毫米的研磨鋼珠,分別蓋緊管蓋后,置入24孔研磨適配器中,再將適配器固定在研磨機中。
c.將Tissuelyser多樣品組織研磨機的參數設置為***赫茲,研磨***秒,啟動(dòng)研磨器。
d.研磨停止后,拿出研磨離心管,旋開(kāi)管蓋,取出研磨好的葉片組織樣品。
4)結果:
研磨后的效果如圖2,葉片組織成很細膩的泥漿狀,說(shuō)明Tissuelyser多樣品組織研磨機對葉片組織的研磨效果良好。順帶附上研磨黃豆(堅硬的植物種子)的研磨對比圖。
圖2 水稻葉片研磨對比
圖3 黃豆研磨對比
第三部分 結合液氮使用凈信tissuelyser研磨機
當樣品死活無(wú)法破碎/樣品傲嬌要低溫環(huán)境時(shí),上海凈信Tissuelyser多樣品組織研磨機+液氮=問(wèn)題輕松解決。以血管和植物葉片為例,具體操作方法如下:
血管:
取0.1克新鮮血管,用剪刀剪成若干小塊,然后放入2毫升離心管中,加入1顆6mm研磨鋼珠,蓋上管蓋。將整個(gè)試管放入液氮中冷凍1分鐘左右或直到液氮不沸騰,然后放入機器處理30秒鐘。取出樣品管可見(jiàn)樣品被破碎成乳白色粉末,然后加入提取緩沖液,可以進(jìn)行接下來(lái)的后續提取,加入緩沖液之前能保證樣品溫度一直處于-20℃以下。
葉片:
取0.2克植物葉片,清潔葉片表面后放入離心管中,加入1顆直徑5mm不銹鋼研磨鋼珠,蓋上管蓋。將整個(gè)試管和適配器放入液氮中冷凍1分鐘左右或直到液氮不沸騰,然后取出放入研磨機器中機器處理30秒鐘。取出樣品管可見(jiàn)葉片被破碎成綠色粉末,然后加入提取緩沖液,進(jìn)行接下來(lái)的后續提取即可,加入緩沖液之前能保證樣品溫度一直處于-20℃以下。
后記
想入手這個(gè)神器,但又對研磨效果有所猶疑的小伙伴,現在上海凈信部分研磨機產(chǎn)品可申請試用,是時(shí)候下手了。激動(dòng)人心的還有,近期研磨機好價(jià),試用爽了直接入手一臺也是毫不含糊的。詳情可致電或,亦可瀏覽http://www.tissuelyser。。com/了解更多。