(以下內容只是簡(jiǎn)單介紹,詳細情況,可咨詢(xún)本公司,)
儀器介紹 :
Tissuelyser-48高通量組織研磨器可以在1分鐘內對48個(gè)樣本進(jìn)行快速、有效的研磨。它可以用于多種不同材料進(jìn)行碾磨和混合以及均質(zhì)化處理。樣本的種類(lèi)包括:植物組織、動(dòng)物組織、細胞、細菌和酵母等等。對于提取大通量樣本中的核酸,不但能夠幫助廣大科研用戶(hù)從簡(jiǎn)單重復的體力勞動(dòng)中解放出來(lái),而且大大減少工作量,提高研磨效率和質(zhì)量。
工作原理 :
Tissuelyser-48具有*的碾磨罐或適配器安裝固定系統,操作者可以快速、簡(jiǎn)單并地將它們定位。
研磨器具有自鎖裝置可以防止碾磨罐或適配器在粉碎過(guò)程中松開(kāi)脫落 ,保障了操作的。
在裝樣本的碾磨罐或離心管中加入小鋼珠,研磨罐或適配器在水平方向上進(jìn)行圓弧式徑向振動(dòng),在高頻震動(dòng)作用下,小球高速擊打樣品來(lái)完成樣品的研磨。根據樣本的不同放入鋼珠的大小和數量也不相同,球與球之間的摩擦撞擊作用可以有效導致組織或細胞的破碎。
主要特點(diǎn):
快速研磨----可以在2-4分鐘內對48個(gè)樣本進(jìn)行快速、有效的研磨。
低溫研磨環(huán)境----將放有樣品的碾磨罐浸入液氮中冷卻1-2分鐘,取出后移至主機快速固定即可開(kāi)始研磨,不需要進(jìn)行再次冷凍處理,節省液氮。
不易導致交叉污染----使用封閉式碾磨罐或一次性離心管。
高重復性----同一組織樣本設定相同程序,獲得相同的研磨效果。
適合多種樣本----植物樣本(水稻、玉米、小麥、豆子、花生等等),動(dòng)物樣本(肌肉、小腸、心、肝、肺、皮毛、骨頭等等),細菌和酵母樣本。
操作靈活、簡(jiǎn)單----每次可粉碎1-48個(gè)樣本,可選擇研磨罐、24孔或48孔適配器;震蕩速度可在3-60HZ之間選擇;按鍵式數字設置研磨時(shí)間和頻率。
操作說(shuō)明:(以小鼠肺臟組織為例)
(1) 打開(kāi)開(kāi)關(guān),接通電源,檢查電源指示燈“PWR”與連接指示燈“COM”是否顯示正常。
(2) 研磨設定:按設置鍵盤(pán)SET按鈕進(jìn)行設定。
①率設定:根據組織部位和大小選擇適當頻率,一般50-60HZ。此處肺組織為0.5g,設定頻率為50Hz。
②時(shí)間設定:根據組織部位和大小選擇適當時(shí)間,一般為60s-100s。肺組織較軟,不是碎性組織,時(shí)間設定為80s。
設定完畢后點(diǎn)擊“ENT”鍵進(jìn)行確認。
(3) 根據實(shí)驗樣品數量及組織大小選取24孔或48孔樣品托盤(pán)。(24孔板放置5ml離心管,48孔板放置2ml離心管)。此處選擇48孔樣品板及2ml 離心管。
(4) 向準備好的樣品離心管內放入1-2粒鋼珠,關(guān)好離心管蓋。(注:研磨組織與PBS液體總容積勿超過(guò)離心管總容積的2/3,組織與PBS液體積比約為1:3-1:5,此處研磨時(shí)加PBS 1ml 以確保充分研磨)。將離心管放入樣品托盤(pán),注意對齊配平。
(5) 將樣品托盤(pán)固定在研磨室內部軸上,蓋上固定蓋,擰緊固定螺母。蓋上研磨室蓋門(mén),扣好門(mén)鎖。
(6) 按下啟動(dòng)按鈕,此時(shí)啟動(dòng)按鈕顯示綠色,顯示屏時(shí)間顯示運行,等待研磨結束。
(7) 研磨結束,打開(kāi)研磨室蓋門(mén),擰開(kāi)螺母和固定蓋,取出研磨好的樣品,進(jìn)行后續實(shí)驗。
(8) 若進(jìn)行組織樣品RNA提取,1000rpm離心1分鐘,離去較大組織塊,取250ul上清進(jìn)行RNA提??;若進(jìn)行病毒RNA提取,10000rpm離心2min,取250ul上清進(jìn)行RNA提取。
注:研磨后為保證RNA的量,好迅速提取RNA。如果暫時(shí)不提取,可凍至-80冰箱,但盡量避免多次凍融。
如果需提取DNA,擔心研磨的太碎,可降低相應研磨時(shí)間為:60S,或工作頻率 45HZ