周密的實(shí)驗設置方案，以及成像前對細胞的優(yōu)化、可重復的處理，是顯微鏡實(shí)驗成功的關(guān)鍵。為此，必須考慮幾個(gè)因素，這些因素取決于顯微鏡方法和所使用的一般設置。那么，實(shí)驗方案的關(guān)鍵問(wèn)題是什么？

　　*如何為您的實(shí)驗和顯微鏡技術(shù)選擇應用幾何形狀的實(shí)驗器皿？

　　存在多種細胞培養容器以滿(mǎn)足不同細胞培養測定的復雜性，例如使用懸浮或粘附細胞的實(shí)驗、2D或3D測定、單培養或共培養測定等等。主要培養容器的幾何形狀（如生長(cháng)面積和體積）是影響實(shí)驗結果和解釋的重要因素，在開(kāi)始之前應仔細考慮。此外，容器幾何形狀影響實(shí)驗中的物理（例如蒸發(fā)）和光學(xué)（例如彎液面效應）特性。

　　ibidi的解決方案

　　ibidi提供各種幾何形狀的成像小室

　　*您為您的特定細胞類(lèi)型和顯微鏡方法選擇了合適的基底、表面和涂層了嗎？

　　細胞的培養、生長(cháng)、發(fā)育和信號傳導強烈依賴(lài)于用于細胞培養的表面。此外，光學(xué)規格要求強烈決定了哪種基底是可取的。硼硅酸鹽玻璃被廣泛用作基底，然而，涂層可能是支持細胞粘附所必需。然而，如果細胞表面需要特定的細胞外基質(zhì)，則可以使用涂層，例如膠原I、膠原IV或聚-L-賴(lài)氨酸。對于懸浮細胞或球體培養，則應使用非粘附表面，如ibidi Bioinert生物惰性表面。此外，還需要考慮是進(jìn)行2D還是3D實(shí)驗。

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　　ibidi µ-Slides, µ-Dishes, and µ-Plates的突出特點(diǎn)是其超薄的蓋玻片底部，非常適合顯微鏡應用。ibidi提供 ibidi Polymer Coverslip聚合物塑料底和ibidi Glass Coverslip玻璃底的實(shí)驗器皿；也提供具有各種表面和涂層的成像小室，例如用于直接培養貼壁細胞的ibiTreat (tissue culture-treated) ibiTreat（組織培養處理的）表面。

　　Non-Adherent Bioinert Surface非貼壁生物惰性表面是一種穩定、生物惰性的表面，用于在沒(méi)有任何細胞或生物分子粘附的非粘附表面上對類(lèi)器官、球體和懸浮細胞進(jìn)行長(cháng)期培養和高分辨率顯微鏡觀(guān)察。目前有 µ-Dish?35mm, high?Bioinert?！　?/p>

　　ibidi µ-Patterning technology實(shí)現了各種2D和3D細胞培養應用的空間定義的細胞粘附。小型化的粘合劑圖案（例如，線(xiàn)、正方形或點(diǎn)）不可逆地印刷在ibidi Polymer Coverslip的非粘性生物惰性表面上，從而實(shí)現精確控制的細胞粘附?！　?/p>

　　*您能確保細胞在培養過(guò)程中以及整個(gè)成像過(guò)程中都是健康的嗎？

　　顯微鏡可以做活細胞和固定細胞，這取決于實(shí)驗設置和所需的讀數。因此，任何成像實(shí)驗都只能使用有活力和健康的細胞。為了確保這一點(diǎn)，應每天在顯微鏡下控制細胞附著(zhù)、形態(tài)、融合、營(yíng)養供應和污染跡象。此外，一些參數，如溫度和濕度，必須保持一致?！　?/p>

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　　許多顯微鏡技術(shù)，如相位對比、寬場(chǎng)熒光和共聚焦顯微鏡，都可以不受限制地使用任何具有ibidi Polymer Coverslip聚合物塑料底和ibidi Glass Coverslip玻璃底的ibidi實(shí)驗器皿?！　?/p>

　　*當計劃一個(gè)活細胞成像實(shí)驗時(shí)，您的設置是否滿(mǎn)足所有必要的要求？

　　如果連續或在特定時(shí)間點(diǎn)需要多個(gè)圖像，那么活細胞成像可能是您的較佳選擇。為了在活細胞成像實(shí)驗中保持細胞的存活和健康，須在顯微鏡上建立和維持生理條件—與培養箱內的設置相同。

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　　ibidi Stage Top Incubation Systems 孵育系統可用于載玻片/培養皿和多孔板。它允許在任何倒置顯微鏡上進(jìn)行短期和長(cháng)期分析期間準確可靠地控制重要的活細胞成像參數。如果需要額外控制氧氣水平，ibidi Stage Top Incubation Systems, CO2/O2 孵育系統是理想的解決方案?！?/p>