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內皮細胞(ECs)是排列在血管內表面的特化細胞,可形成連續的單細胞層,在控制血流和周?chē)M織之間的物質(zhì)交換中起著(zhù)至關(guān)重要的作用。在這篇文章中,我們將探討心血管系統的內皮細胞,研究如何在體外研究?jì)绕ぜ毎淖饔谩?/span>
圖1.研究血管生成過(guò)程,如血管發(fā)芽和趨化性,對于理解腫瘤血管形成至關(guān)重要
應用實(shí)例1:闡明間隙連接在內皮細胞遷移中的作用
間隙連接蛋白43(Cx43)在EC遷移和血管生成中的作用,在人微血管內皮細胞(HMEC)中,siRNA敲低Cx43可減少細胞遷移(圖2)。為了研究CX43在EC遷移中的作用,如先前研究所述,將 ibidi Culture-Inserts插件放置在 µ-Slide 8Well(8孔腔室載玻片)中,以評估遷移速度和方向性。
該小組表明:內皮細胞遷移和血管生成需要Cx43,而這是由SHP-2介導的。
圖2.HMEC遷移單細胞軌跡顯示Cx43 siRNA敲除后遷移減少
應用實(shí)例2:血腦屏障體外模型的建立
血腦屏障由于其在大腦中的位置以及對恒定、層流和均勻血流的需求而存在困難。為了應對這些挑戰,研究人員開(kāi)發(fā)了一種堅固、低成本的裝置,將上部通道連接到 ibidi Pump System ibidi泵系統/流體剪切力系統,建立四天的培養基單向循環(huán)以模擬生理條件。
該裝置適用于評估屏障功能(圖4)和研究藥物通過(guò)血腦屏障的轉運。此外,ibidi泵系統和µ-Slide具有評估和復制在人體細胞類(lèi)型(如腸道或腎臟)中發(fā)現的屏障的潛力。
建立一個(gè)具有調節流動(dòng)的系統可以在類(lèi)似體內的條件下研究?jì)绕ぜ毎?,這比靜態(tài)系統更好地模擬真實(shí)的生理狀態(tài)。
圖4.在靜態(tài)條件下(a)和靜態(tài)流動(dòng)下(b)培養7天的細胞,顯示內皮單層特化。藍色細胞核、綠色F-肌動(dòng)蛋白、黃色β-連環(huán)蛋白粘附連接和紅色ZO-1緊密連接。
圖5.血流產(chǎn)生的剪切應力直接影響細胞極化、蛋白質(zhì)表達和形態(tài)
應用實(shí)例3:解讀線(xiàn)粒體在內皮細胞健康中的作用
實(shí)驗研究結果表明,線(xiàn)粒體斷裂在暴露于紊亂流動(dòng)的區域增加,而細長(cháng)的線(xiàn)粒體在單向流動(dòng)的區域占主導地位。這表明流動(dòng)模式對線(xiàn)粒體融合/分裂事件有深遠的影響,影響內皮細胞的促炎和代謝狀態(tài)。研究人員使用了 ibidi Pump System ibidi泵系統/流體剪切力系統來(lái)研究流動(dòng)模式相關(guān)的動(dòng)力學(xué)。
總之,這項研究表明,流動(dòng)對內皮細胞的健康有著(zhù)至關(guān)重要的影響,這在一定程度上是由于線(xiàn)粒體的變化。
這些實(shí)驗研究主要是為了研究探討心血管系統中的內皮細胞以及體外研究?jì)绕ぜ毎囊饬x,旨在了解內皮細胞在不同生理環(huán)境中的作用,這使我們能夠認識到,不僅內皮細胞的規格和狀態(tài)很重要,而且它們的環(huán)境也很重要。