1.哪些特定應用使用µ-Slide VI 0.1？

如果實(shí)驗中的細胞數量有限(例如當使用原代小鼠細胞時(shí))，或者使用最少量的試劑做進(jìn)行免疫熒光，建議使用µ-Slide VI 0.1?。對于灌注實(shí)驗，µ-Slide VI 0.1?會(huì )產(chǎn)生-較-高-水-平的剪切應力。

2. µ-Slide內的流型是Y型湍流嗎？

不是，當使用標準流速和水性介質(zhì)時(shí)，在小通道中無(wú)法真正實(shí)現湍流特性。無(wú)量綱雷諾數(Re)用于表征不同的流型。層流發(fā)生在低雷諾數，而湍流發(fā)生在高雷諾數。表明管道和生物容器中層流的臨界雷諾數是Re=2000。雷諾數超過(guò)Re 4000，最有可能代表湍流。即使在 µ-Slide y-shaped中流速非常高（60毫升/分鐘），雷諾數仍非常低，約為Re=200，表明層流。

3.多大的剪切應力適合于滾動(dòng)和粘附分析？

在滾動(dòng)和粘附分析中，應該使用與內皮細胞層的標準流動(dòng)調節相同的參數。有兩件事需要考慮： 首先，在進(jìn)行滾動(dòng)和粘附實(shí)驗之前，內皮細胞層應該進(jìn)行幾天的流動(dòng)調節。這個(gè)階段的剪切應力可能不同于在滾動(dòng)和粘附期間施加的剪切應力。其次，在粘附試驗中，灌注培養基的速度也起作用?？赡苄枰淖兗羟袘?。此外，有必要測試最佳流速/剪切應力。

4.在進(jìn)行分析之前，應該對細胞層施加多長(cháng)時(shí)間的剪切應力？

細胞對機械剪切應力的適應性反應可長(cháng)達數天。因此，根據您正在研究的標記，可能有必要在分析前對細胞層進(jìn)行長(cháng)達幾天的調節。我們建議在長(cháng)期實(shí)驗中測試感興趣的參數，以確定最佳的測量時(shí)間點(diǎn)。

5.應該對內皮細胞施加多大的剪切力？

生理剪切應力取決于感興趣的組織和血管類(lèi)型。根據文獻，人體內的生理剪切應力值在0至60dyn/cm2之間變化。在開(kāi)始實(shí)驗之前，確定適用于所用細胞類(lèi)型的相關(guān)剪切應力范圍至關(guān)重要。

6.如何增加流動(dòng)分析中的細胞數量？

將通道載玻片串聯(lián)到一個(gè)灌流裝置/流體單元中，可以輕松地增加流式檢測中細胞的數量。應用說(shuō)明書(shū)25（這是個(gè)鏈接2022-07-15發(fā)布的公眾號）提供了連接多個(gè)通道載玻片到一個(gè)流體單元的詳細方案。 此外，將細胞播種到通道底部和頂部，也可以增加通道中的細胞數量。

7.在開(kāi)始流動(dòng)之前，細胞應該附著(zhù)多久？

在流動(dòng)開(kāi)始之前，細胞必須緊密附著(zhù)在通道載玻片底部。附著(zhù)時(shí)間取決于細胞類(lèi)型、培養基添加物和表面。例如，在膠原涂層表面上使用HUVEC時(shí)，附著(zhù)時(shí)間只需半小時(shí)。之后，就可以施加剪切應力。為了使細胞有機會(huì )適應新的環(huán)境條件，建議逐步增加剪切應力。

8.硅珠如何再生？

將硅膠珠加熱即可輕松再生。請按照ibidi泵系統的說(shuō)明書(shū)中的方案進(jìn)行回收。

9.灌注裝置多久可以重復使用一次？

我們不建議重復使用灌注組件。每次實(shí)驗都使用一個(gè)新的灌注裝置，可獲得最可復制和較-可-靠的結果。您可以在ibidi泵系統說(shuō)明書(shū)中找到有關(guān)滅菌和清潔的其他信息。

11.如何確保細胞獲得孵化后的空氣？

ibidi泵系統的設置確保來(lái)自培養箱內部的具有正確CO2濃度的無(wú)菌空氣驅動(dòng)灌注。有關(guān)詳細說(shuō)明，請參見(jiàn)ibidi泵系統的說(shuō)明書(shū)。

12.如何計算通道載玻片中懸浮細胞的剪切應力？

在通道中通過(guò)液體時(shí)，壁面摩擦會(huì )導致流動(dòng)速度呈拋物線(xiàn)形。通道中心的流速將比壁面快。剪切應力僅在通道或管道的壁面上發(fā)生。因此，只有附著(zhù)在通道壁/底部的細胞才會(huì )經(jīng)歷剪切應力。通道中央的懸浮細胞將經(jīng)歷不同的流速，與靠近通道壁的細胞不同。因此，對于懸浮細胞，剪切速率是需要考慮的相關(guān)因素，而不是剪切應力。