您聽(tīng)說(shuō)過(guò)有關(guān)ibidi聚合物蓋玻片的完整故事嗎？畢竟，它是我們µ-Slides、µ-Dishes和µ-Plates的核心，在很大程度上促成了我們的成功。

　　這一切都始于2000年代初，當時(shí)三名博士生和他們的PI有一個(gè)愿景，即成立一家通過(guò)結合細胞培養和高分辨率顯微鏡來(lái)*改變基于細胞的分析的公司。到目前為止，細胞生物學(xué)家不得不在對細胞生長(cháng)有利但對成像不利（例如，聚苯乙烯制成的組織培養瓶）或對成像有利但對細胞生長(cháng)不利（例如，玻璃蓋玻片）的表面之間進(jìn)行折中。

　　這種困境促使ibidi創(chuàng )始人開(kāi)始尋找一種即具有玻璃光學(xué)特性的材料，同時(shí)又能保證良好的細胞粘附和生長(cháng)。他們最終發(fā)現了一種具有出色光學(xué)質(zhì)量的聚合物箔，這就是ibidi聚合物蓋玻片。它可以粘合到上部結構，這種組合是第一個(gè)ibidi顯微鏡室。然而，這種特殊的聚合物箔非常疏水，細胞不會(huì )粘附在上面。幸運的是，創(chuàng )始人發(fā)現聚合物箔可以通過(guò)物理處理來(lái)解決這個(gè)問(wèn)題，特殊的表面處理ibiTreat誕生了！

　　ibidi聚合物蓋玻片的光學(xué)特性

　　使用帶有聚合物蓋玻片底部的ibidi實(shí)驗室器具進(jìn)行顯微鏡檢查的科學(xué)家們通常甚至沒(méi)有意識到它不是由玻璃制成的——僅僅是因為您無(wú)法分辨成像質(zhì)量的差異。

　　那么，這是為什么呢？某些材料特性對于高質(zhì)量的顯微鏡檢查是不可少的。我們將仔細研究其中五個(gè)參數（蓋玻片厚度、折射率、阿貝數、透射率和自發(fā)熒光），以及ibidi聚合物蓋玻片的規格與玻璃和傳統聚苯乙烯組織培養容器的比較。

　　蓋玻片厚度

　　蓋玻片的厚度在成像質(zhì)量中起著(zhù)重要作用，因為大多數顯微鏡物鏡都設計為聚焦在具有一定厚度的蓋玻片頂部的樣本上（圖1）。在細胞顯微鏡中，標準蓋玻片厚度為0.17mm(170µm+20/–10µm)，對應于#1.5蓋玻片。雖然大多數聚苯乙烯組織培養板和培養皿的底部厚度為500–1000µm，但ibidi聚合物蓋玻片的厚度與標準#1.5玻璃蓋玻片的厚度相同。

　　圖1：顯微鏡物鏡針對170µm的標準蓋玻片厚度進(jìn)行了優(yōu)化（左）。使用其他蓋玻片厚度高分辨率物鏡無(wú)法聚焦在樣品上（右）。

　　折射率

　　ibidi聚合物蓋玻片的折射率（測量特定材料內的光速）為1.52，因此與玻璃的折射率相同。相比之下，由聚苯乙烯制成的標準組織培養板和培養皿的折射率為1.58。這個(gè)值很重要，因為顯微鏡物鏡是為折射率為1.52的蓋玻片設計的。

　　透光率

　　為了提供高質(zhì)量的成像結果，顯微鏡載體的傳輸能力必須在各種不同的波長(cháng)上都很高。玻璃和ibidi聚合物蓋玻片就是這種情況。標準聚苯乙烯材料會(huì )阻擋紫外線(xiàn)，這使得它們并不真正適用于所有顯微鏡技術(shù)和熒光團（圖2）

　　圖2：各種蓋玻片和細胞培養材料在不同波長(cháng)下的透射曲線(xiàn)。

　　自發(fā)熒光

　　顯微鏡載體材料的自發(fā)熒光特性可以通過(guò)在顯微鏡下顯示為高背景信號來(lái)干擾成像過(guò)程。雖然ibidi聚合物蓋玻片材料和玻璃的自發(fā)熒光非常低，但由聚苯乙烯制成的培養皿具有非常高的自發(fā)熒光（圖3）。

　　圖3：不同蓋玻片和細胞培養材料在不同波長(cháng)下的自發(fā)熒光強度。

　　ibidi聚合物蓋玻片的細胞培養特性

　　到目前為止，我們已經(jīng)談了很多關(guān)于ibidi聚合物蓋玻片的光學(xué)特性以及它如此適合高質(zhì)量成像的原因，但細胞呢？

　　他們在這個(gè)表面上感覺(jué)舒服嗎？他們喜歡依附并在上面成長(cháng)嗎？答案很簡(jiǎn)單，是的！這就是為什么：

　　表面剛度

　　首先，塑料比玻璃更柔軟，這使得它的表面彈性更類(lèi)似于體內組織(Discheretal.,2005;）

　　圖4：不同組織以及蓋玻片和細胞培養材料的表面彈性。

　　組織培養處理

　　其次，與玻璃相比，塑料的表面可以進(jìn)行修飾，使其更具親水性，這是大多數貼壁細胞類(lèi)型所喜歡的。這種物理表面處理（不是涂層）通常稱(chēng)為組織培養處理。大多數用于細胞培養的塑料容器都是以這種方式修改的。在ibidi，我們將聚合物蓋玻片的組織培養表面改性稱(chēng)為“ibiTreat”，它不是蛋白質(zhì)涂層，而是增強細胞附著(zhù)的物理表面處理。當然，額外的蛋白質(zhì)涂層可以應用于未涂層的ibidi聚合物蓋玻片或ibiTreat版本，而不會(huì )影響光學(xué)質(zhì)量。

　　透氣性

　　細胞喜歡在ibidi聚合物蓋玻片上生長(cháng)的第三個(gè)原因是其透氣性。這允許通過(guò)整個(gè)底部表面進(jìn)行氣體交換，為細胞提供新鮮的O2并允許CO2離開(kāi)細胞環(huán)境（圖5）。

　　圖5：與玻璃（右）相比，聚合物蓋玻片允許通過(guò)底部表面進(jìn)行氣體交換（左）。

　　鑒于上述所有原因，ibidi聚合物蓋玻片結合了兩方面的優(yōu)點(diǎn)——高分辨率成像的理想光學(xué)和細胞附著(zhù)和生長(cháng)的*佳表面*。還是不服氣？可立即訂購免費樣品。